|
Técnica Home Nikon UIC Hamamatsu Molecular Catálogos Contacto Eventos Links Conocimiento Tablero Avisos (BBS) Entre Usuarios Huespedes Buscar Cotizar Nosotros Dage Directorio Downloads Aviso Legal Donaciones
Aplicaciones MetaMorph MetaFluor MetaVue Discovery
Deconvolución y Reconstrucción 3D Reconstruccion 3D Fluorescencia, GFP Recursos
|
|
Con MetaMorph, usted puede hacer sofisticados
protocolos de tiempo fácilmente para sus experimentos fluorescentes. La
interfase dedicada del usuario para los experimentos de pruebas
fluorescentes graba las condiciones de operación, lo que facilita correr
estudios similares.
MetaMorph puede adquirir imágenes sencillas o
varias imágenes durante experimentos de lapso de tiempo. Usted puede
adquirir uno o dos colores fluorescentes y una imagen de luz transmitida
(contraste de fases, DIC, luz polarizada) y sobreponer la imagen
fluorescente con las de luz transmitida en una imagen de color.
La
proteína verde fluorescente (GFP), de la Aequorea victoria, (la misma
medusa que provee el indicador de calcio aequorina), ha estimulado una
gran cantidad de excitación entre los biólogos moleculares y aquellos que
estudian células desde la publicación de Chalfie et al. (1994)
|

El GFP fue usado para seguir los sitios
donde hay contacto de célula a célula. Cortesía del Dr. M. Davis C.
Wulefing, y M Sjaastad. Universidad de Stanford. |
|
Esto
es debido a que el GFP es una pequeña proteína (27 Kd) y las secuencias
de DNA codificadas para el GFP se pueden manipular re-combinando la
tecnología DNA para crear fusiones de genes entre el GFP y cualquier
proteína de interés.
Tales
construcciones de DNA se pueden introducir en células vivas para expresar
la marcación del GFP fluorescente en la proteína de interés para
el investigador. (note que en la vida real, algunas fusiones de genes
pueden evitar que el GFP emita fluorescencia y/o pueda no ser funcional
para la proteína de interés). El mayor uso de la marcación es para
localizar proteínas de interés a un tipo específico de células y/o
localización sub-celular en células vivas y organismos.
Un buen ejemplo del
tipo de fusión de proteínas que se pueden hacer es la publicación de
Olson et al. (1995) en GFP-MAP4. |
El
rango de posibilidades se revisa en Chalfie (1995) Stearns (1995) y Kain
et al (1995)
Moriyoshi
et al. (1996) ha demostrado la fusión de GFP-genes transferidos en
neuronas post-mitosis usando adenovirus recombinados mediados por
transferencia de genes por una infección viral. Esto abre las
posibilidades de marcar células u organelos, tales como el crecimiento de
conos nerviosos, con GFP.
El
GFP también se usa como reporte de expresión de genes. En este caso la
secuencia del código GFP DNA se coloca atrás de un promotor (y/o una
secuencia DNA regulatoria) de interés, y se introduce en las células.
Esto ha excitado a varios biólogos moleculares ya que esto significa que
ellos pueden realizar estudios de promotores detallados en organismos
vivos. Conozca másÞ
|
|

Pruebe su conocimiento:
¿Verdadero o Falso?
Vea la respuesta más abajo

SMALL WORLD
El concurso
internacional de Nikon para fotografías tomadas a través del microscopio.
Entérese o entre al concurso en línea.
Este sitio esta en Ingles

Aprende algo Nuevo

Respuesta a Pruebe su conocimiento: La respuesta es: |