Kaede | Kaede
PALABRAS CLAVE: Fluorescencia, fluoróforo, imagen de células vivas, confocal
DEFINICIÓN:
Kaede es una proteína verde fluorescente que se puede convertir irreversiblemente a rojo con irradiación de luz UV.
TECNOLOGÍA:
La Kaede es una proteína que se aíslo del coral Trachyphyllia geoffroyi. La proteína contiene un tripéptido, His 62 – Tyr 63 – Gly 64. este es un cromóforo verde que es foto-convertible a rojo posterior a una irradiación UV (luz 350-410nm). La iluminación máxima resulta en un incremento 2000 veces en el cociente de la fluorescencia verde-a-rojo. La Kaede tiene el beneficio de que la luz de excitación usada para sacar la fluorescencia verde no induce la foto-conversión. La foto-conversión se puede realizar selectivamente con el direccionamiento apropiado de la luz de excitación UV.
APLICACIONES:
Como con la GFP, la Kaede puede ser codificada genéticamente en células y es fácilmente detectable por técnicas de microscopia fluorescente estándar. La Kaede tiene amplias aplicaciones en biología celular y molecular y brinda un técnica simple para marcar células individuales, organelos y proteínas en aplicaciones de imágenes de células vivas.
CONFIGURACIÓN DEL MICROSCOPIO:
La Kaede se puede visualizar en cualquier microscopio biológico vertical o invertido con capacidades de epí-fluorescencia o microscopios estereoscópicos con iluminador de fluorescencia (también conocido como iluminador de GFP). Todo el potencial para las dinámicas de células vivas usando Kaede se logra con la imagen confocal.
SISTEMA RECOMENDADO:
Para completa flexibilidad en la obtención de imágenes con células vivas usando Kaede, las series de microscopios Ti, TE2000 pueden ser configurados con fluorescencia de campo amplio- y/o sistema de iluminación TIRF, los confocales C1, C1si o LiveScan Sweptfield que ofrecen una amplia variedad de capacidades de imagen. El CLEM se puede usar con el C1 para reducir el foto-blanqueamiento y brinda mayor flexibilidad en estudios de lapso de tiempo. Las series de microscopios Nikon Ti, TE2000 incluyen la tecnología “eliminadora de ruido” para mejorar los cocientes señal entre ruido. Varios objetivos especializados están disponibles (Plan Fluor, Súper Plan Fluor, Plan Apocromático, Plan Apocromático VC)
LIGAS:
