Iluminación | Iluminación

PALABRAS CLAVE: Excitación, confocal, foto-toxicidad, foto-blanqueamiento, Koehler, iluminación oblicua, diascópica, episcópica, láseres, FRAP, FLIP, CLEM, iluminador de mercurio con fibra

DEFINICIÓN:

La iluminación es la radiación incidente a un espécimen en el microscopio.

TECNOLOGÍA:

La iluminación es posiblemente el factor más crítico en la determinación del desempeño general del microscopio óptico y debe ser brillante, libre de destellos y dispersada uniformemente en el campo de observación. Están disponibles varios sistemas dependiendo de la técnica de imagen y la aplicación y puede ser integrada al microscopio o externa a este. El uso de la iluminación diascópica o episcópica, rango de longitud de onda, intensidad y ángulo de iluminación todo ello afecta a la imagen y la información que se puede obtener desde el espécimen. La iluminación también se puede modificar para técnicas especializadas con la agregación de filtros, polarizados, anillos de fase, etc.

La mayoría incorporan un bulbo integral de tungsteno-halógeno que permite controlar fácilmente la intensidad. El vapor de mercurio, xenón y las lámparas de arco de zirconio también son fuentes de iluminación útiles para formas de microscopia especializada. En la imagen fluorescente por ejemplo, la fuente de luz debe ser lo suficientemente poderosa para producir fluorescencia observable desde los fluoróforos en el espécimen. Las lámparas de descarga-de-arco de mercurio y xenón son las usadas más comúnmente en las aplicaciones fluorescentes de campo amplio, mientras que los láseres son necesarios para las aplicaciones confocales de escaneo láser. Los láseres tiene la ventaja de ser una fuente de tamaño pequeño, mientras que brindan luz de alta intensidad, las cuales pueden ser moduladas usando la tecnología de AOM o AOTF.

En los ambientes biológicos la habilidad para dirigir y modular con precisión la intensidad de la iluminación (especialmente en imágenes confocales fluorescentes) es deseable para preservar la viabilidad de la célula. La habilidad de dirigir con precisión la iluminación láser es esencial para técnicas como FRAP y FLIP.

APLICACIONES:

La iluminación correcta se requiere para todas las aplicaciones de imagen microscópicas tanto en los campos biológicos como industriales. Para imágenes óptimas todos los componentes ópticos en el microscopio, incluyendo el iluminado, deben ajustar y alinearse correctamente. Además una iluminación estable, sin destellos es un requerimiento para obtener imágenes de epí-fluorescencia.

CONFIGURACIÓN DEL MICROSCOPIO:

Nikon provee un amplio rango de sistemas de iluminación diseñado para técnicas de imagen específicas tanto en ambientes biológicos como industriales. Nikon también provee varias tecnologías diseñadas para dirigir y modular la intensidad de iluminación, como el Intensilight (iluminador de mercurio con fibra para epí-fluorescencia) y el sistema CLEM para imágenes de células vivas en confocal.

SISTEMA RECOMENDADO:

El sistema de iluminación dependerá de la técnica de imagen y la aplicación. Por favor consulte a su representante local Nikon para consejos relacionados con sus necesidades de imagen

LIGAS:

Iluminación para microscopía estereoscópica (reflejada) [microscopyu]

Iluminación para microscopía estereoscópica (oblicua) [microscopyu]

Iluminación para microscopía estereoscópica (campo oscuro) [microscopyu]