Bioluminiscencia | Bioluminiscencia

PALABRAS CLAVE: BRET, fluorescencia, fluoróforo, imagen en células vivas, foto-multiplicador.

DEFINICIÓN:

Bioluminiscencia es luz creada por un organismo vivo.

TECNOLOGÍA:

Mientras que el efecto de la bioluminiscencia es similar a la del proceso de fluorescencia, lo que lleva a la generación de la luz es diferente. La fluorescencia resulta de la emisión de un fotón como resulta de la excitación de un electrón. La bioluminiscencia resulta de la emisión de un fotón a través de una reacción química dentro de un organismo (por ejemplo, en las luciérnagas, en el hongo jack o’lattern). La luz es producida por la oxidación de luciferina catalizada por una luciferaza y mediado con frecuencia por ATP y/o iones de calcio (la luciferina y luciferaza son términos no específicos para un sustrato y una enzima envueltos en reacciones que producen luz).

APLICACIONES:

La bioluminiscencia se puede usar para medir co-factores intracelulares y concentraciones iónicas (Ca2+, K+, ATP, NADH). Las reacciones de luciferaza se emplean en comida e industria farmacéutica para detectar contaminantes vivos, en ciencia forense para detectar rastros de sangre, y en ambientes de investigación – la luciferaza se puede transfectar en células vivas y es ampliamente usada como reportero de genes. Las reacciones bioluminiscentes evitan la necesidad de luz de excitación y su foto-toxicidad asociada, y evitan dispara la autofluorescencia de fondo en células vivas.

CONFIGURACIÓN DEL MICROSCOPIO:

La configuración del microscopio dependerá de la aplicación. La limitante principal es la intensidad breve de la luz emitida. Esto requiere de objetivos de gran A. N. y un fotomultiplicador para la detección y medición de fotones. Como con la fluorescencia, la imagen Confocal brinda una resolución mejorada comparada con la técnica de campo amplio y brinda oportunidades para obtener imágenes 3D,

SISTEMA RECOMENDADO:

Esto dependerá en gran medida de las aplicaciones, para mediciones rápidas de iones multidimensionales, el microscopio invertido Nikon Ti-E con el sistema confocal LiveScan Sweptfield ofrece una alta resolución y versatilidad para imagen confocal.