Hoffman, Modulación de Contraste | Modulación de Contraste Hoffman
PALABRAS CLAVE: Contraste de fases, iluminación oblicua, microscopía de polarización, imagen de células vivas, DIC
DEFINICIÓN:
El contraste de modulación Hoffman es una técnica de iluminación oblicua que aumente el contraste convirtiendo los gradientes ópticos en variaciones de intensidad de luz.
TECNOLOGÍA:
La Modulación de Contraste Hoffman fue inventada por Robert Hoffman en 1975. Esta es útil para generación de imágenes con pseudo-relieve de especimenes sin tinción y birrefringentes (por ejemplo, células en cajas de cultivo de plástico). La técnica envuelve colocar un diafragma con una ranura fuera del eje frente al plano focal del condensador. Esto ilumina efectivamente al espécimen con iluminación oblicua. En la parte posterior del plano focal del objetivo hay una placa (el modulador Hoffman) con tres regiones de tamaño diferente de densidad neutra – transparente (100% de transmisión de la luz), gris (15% de transmisión) y gris oscuro (transmisión del 1%).esta se coloca para que la rejilla de apertura se alinee con la región de transmisión de 15%. Cuando la luz pasa a través de las varias regiones de la muestra, la luz se refracta a grados diferentes pasando ya sea a través de las regiones transparentes, grises, o grises oscuras del modulador. Esto tiene el efecto de acentuar las diferencias en contraste. Los filtros polarizadores también se pueden usar en los sistemas de Modulación de Contraste Hoffman para mejorar más el contraste. Las imágenes pueden ser similares a las obtenidas a las imágenes DIC. A diferencia del DIC, sin embargo, la Modulación de Contraste Hoffman no usa prismas divisores del haz. También se puede usar con especimenes no apropiados para DIC (sustancias cristalinas o especimenes vivos en cajas de cultivos plásticos). Las imágenes de Modulación de Contraste Hoffman también evitan los halos que algunas veces se observan en las imágenes de contraste de fases.
APLICACIONES:
La Modulación de Contraste Hoffman se usa para mejorar el contraste tanto en especimenes teñidos como sin teñir.
CONFIGURACIÓN DEL MICROSCOPIO:
Los microscopios Nikon TS100 y TS100-F y las series de microscopios invertidos Ti y TE2000 pueden ser equipados con objetivos y condensadores de Modulación de Contraste Hoffman incluyendo: el CFI HMC 10x A. N. 0.25; DT: 6.2mm), CFI HMC LWD 20x F (N.A. 0.4; DT: 3.1mm), CFI HMC LWD 40x C (N.A. 0.55; DT: 2.7-1.7).
SISTEMA RECOMENDADO:
Para lo más versátil de sistemas de microscopios de imágenes de células vivas, Nikon recomienda las series de microscopios invertidos Ti, TE2000.
*Hoffman Modulation Contrast y HMC son marcas registradas de Modulation Optics, Inc.
LIGAS:
