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Características Clave |
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Un
escaneo para adquirir 320nm |
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Están disponibles
tres resoluciones de longitud de onda, 2.5, 5 y 10nm. Escaneando a
10nm se puede obtener un espectro de 320nm con un solo escaneo,
una capacidad que no iguala ningún sistema espectral anterior. |
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Controles
del Microscopio Simples y Flexibles |
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 Cambiar
entre la observación por los oculares y el modo de escaneo láser
es tan simple como dar clic en un icono. Cuando usa el microscopio
invertido motorizado Ti o el microscopio compuesto Eclipse 90i
(también motorizado), el microscopio se puede controlar a través
del software del C1si, lo que libra al usuario del peso del cambio
de los caminos ópticos y le permite concentrarse en la recolección
de datos. |
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Para
más información, visite www.nikonconfocal.com |
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El
porta confocal de Nikon (www.nikonconfocal.com)
ofrece a los usuarios nuevos y experimentados en microscopia
confocal una cobertura básica y resalta las técnicas comúnmente
usadas en confocal avanzado. Este sitio contiene guías detalladas
de los productos para ayudar a los usuarios a seleccionar el
equipo apropiado para una aplicación particular y contiene ligas a
páginas instructivas y tutoriales interactivos dentro del sitio
Nikon de MicroscopyU |
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Observación
FRAP |
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Los
experimentos de FRAP (Recuperación de Fluorescencia después del
Blanqueamiento por Luz o Fluorescence Recovery After
Photobleaching) son posibles con un macro del programa. El láser
se puede dirigir con precisión para desvanecer regiones de interés
especificadas por el usuario. La región puede ser una elipse, un
círculo, un rectángulo o inclusive un punto o línea. Las regiones
con forma de dona también pueden ser dibujadas permitiendo la
recuperación de la muestra blanqueada desde ubicaciones tanto
dentro como fuera de la región. Otras técnicas de FRAP incluyen el
iFRAP (intervalo FRAP) y el FLIP Pérdida de Fluorescencia por
Blanqueamiento de Luz o Fluorescence Loss In Photobleaching).
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Grabación
de Lapso de Tiempo de Imágenes Espectrales |
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 Ya
que todos los canales espectrales se adquieren con un solo
escaneo, el C1si le permite adquirir temporalmente los datos
espectrales resueltos. Las adquisiciones de series de tiempo se
pueden correr al máximo promedio de cuadros del instrumento, con
un retraso fijado, o con el tiempo especificado por el usuario. |
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Tecnología
de Transmisión Fluorescente de Alta Eficiencia |
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Las
terminaciones de las fibras fluorescentes y las superficies del
detector usan un recubrimiento anti-reflexión propietario para
reducir la perdida de señal al mínimo, obteniendo así una alta
transmisión óptica. |
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Filtrado
de Color Variable |
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 Se
pueden obtener información desde toda la imagen en una sola
operación de imagen espectral. Con el C1si, no hay necesidad de
adquirir un rango limitado y volver a escanear el espécimen para
adquirir el resto del espectro. Después de obtener la imagen
espectral usted puede seleccionar que imágenes mostrar con la
longitud de onda deseada.
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Separación
de Señales Fluorescentes sin Cruce de Banda |
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 El
programa del C1si le permite separar limpiamente las señales de
pruebas fluorescentes, incluyendo aquellas que se sobreponen sus
espectros de manera muy cercana, como el CFP, RFP, YFP y Alexa488.
Esto es particularmente útil en observaciones con varias tinciones
con moléculas proteínicas localizadas, y en experimentos de FRET.
También es posible la separación espectral de las pruebas
fluorescentes desde muestras con auto-fluorescencia. |
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PMT
Multi-Ánodo |
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El detector de imagen
espectral utiliza un nuevo mecanismo de escudo láser. Acoplado con
un diámetro de pinhole independiente de alta resolución de
longitud de onda, este mecanismo previene que el haz láser
reflejado de datos contaminantes. El mecanismo de bloqueo se puede
mover libremente con el software, permitiendo a los usuarios
bloquear cualquier longitud de onda láser, haciendo que el C1si
sea compatible virtualmente con cualquier selección láser. |
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Características
de Adquisición |
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Cambio rápido del
modo del detector - El cambio del modo de imagen confocal
estándar a imagen confocal espectral consiste en cambiar un
interruptor en el cabezal de escaneo. El modo de imagen en el
programa EZ-C1 cambia automáticamente.
(izquierda) Modo de
adquisición Espectral Confocal
(derecha) Modo de
adquisición Espectral Estándar
 Ajuste
de parámetros rápido - Cada parámetro del detector espectral,
p. ej. longitud de onda de excitación láser, longitud de
resolución, o rango de adquisición, se ajusta con facilidad desde
un menú usando el Mouse. Una vez ajustado se pueden realizar las
adquisiciones con el procedimiento común. Los perfiles de los
parámetros se pueden guardar para usarse posteriormente. Tiene una
función de binning que combina la señal de los canales adyacentes
para incrementar la brillantes. Por lo tanto, cuando determina el
área de escaneo, es posible que el usuario reduzca la intensidad
del láser y reduzca el daño al espécimen.
Adquisición de
imágenes espectrales con un clic - Una vez ajustado el
detector espectral, se pueden adquirir imágenes con un solo clic
en el botón Inicio.
 Separación
fluorescente con un clic - Aun sin especificar un espectro de
referencia, simplemente dibuje la región de interés apropiada
dentro de la imagen y de un clic en el botón Simple Unmixing para
realizar la separación de pruebas fluorescentes basado en su
espectro local. Use el botón Unmixing cuando quiera especificar el
color de cada prueba fluorescente que se mostrará después de la
separación. El C1si contiene una base de datos de los datos
espectrales provistos por los fabricantes de marcadores
fluorescentes, el cual se puede especificar como referencia
espectral para la separación fluorescente. Los usuarios pueden
agregar información espectral derivada de la preparación de sus
muestras en esta base de datos.
 Separando
fluoro cromos rojos -
Los fluorocromos
rojos que habían sido un reto, ahora se pueden separa de la misma
forma. |
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Alta
Resolución de Longitud de Onda |
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Hemos obtenido alta
resolución espectral a través del uso de una rejilla de difracción
con graduación muy fina, soportando un ancho de canal de 2.5nm
para espectroscopia confocal de alta resolución. Los otros dos
anchos de canal, 5nm y 10nm, están disponibles para la separación
de pruebas cercanas que se sobreponen o para obtener imágenes de
cuatro o más pruebas en forma simultánea. |
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Detector
Espectral con Tecnología de Control de Polarización |
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 El
control de polarización propietario de Nikon DEES o Sistema de
Mejora de Eficiencia de Difracción, ha sido adoptado en el
detector espectral del C1si para maximizar la brillantes.
Co-alineando la dirección de la polarización, se optimiza la
eficiencia de la rejilla de difracción, esto da como resultado
imágenes con brillantes excepcional. Mejorando en particular, la
eficiencia de difracción en el rango largo de longitud de onda
llevando una mejora de brillantes y linealidad de los datos
espectrales sobre todo el rango visible desde el rojo al azul. |
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Adquiriendo
Colores Fluorescentes Reales |
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 La
adquisición de imágenes fluorescentes espectrales en color real se
pueden realizar gracias a innovadoras características para
corregir de forma precisa los datos espectrales y la resolución de
longitud de onda independientemente del diámetro del pinhole. Los
picos del espectro fluorescente y las diferencias en las formas
espectrales pueden ser detectados por la adquisición espectral con
un alto grado de confianza y precisión. En donde antes se
utilizaban colores falsos para retratar detalles, el C1si permite
la observación de especimenes en color verdadero.
Los picos de longitud de onda y las formas espectrales obtenidas
por el C1si empatan de forma muy cercana a las obtenidas por los
fabricantes de las pruebas.
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Gentil
con células vivas y tejidos |
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Se pueden obtener
imágenes espectrales sobre un amplio rango de longitud de onda con
una sola excitación láser. Por lo tanto, el ajuste de la
intensidad láser y del PMT es simple y rápida, y no necesita
realizar varios escaneos para adquirir un espectro amplio,
evitando que la fluorescencia se desvanezca y reduciendo al mínimo
el daño al espécimen. El sistema de imagen espectral C1si es
gentil con células vivas y tejidos. |
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Soberbia
Corrección de Error y Desviación |
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La precisión del
espectro se mantiene con tecnologías de corrección de alta
precisión, incluyendo la corrección de longitud de onda usando
líneas de emisión y corrección de luminosidad utilizando una
fuente de luz rastreable del NIST (National Institute of Standars
and Technology). Además, la tecnología de corrección de
sensibilidad del PMT Multi-ánodo* permite la corrección de error
en la sensibilidad y las propiedades de transmitancia de longitud
de onda en base a cada canal, permitiendo a los investigadores
reducir los errores de medición y desviaciones entre diferentes
equipos.
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Procesamiento
de Señal de Doble Integración |
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 El
nuevo desarrollo del DISP ha sido implementado en los circuitos de
procesamiento de imagen para mejorar la eficiencia eléctrica,
previniendo la perdida de señal mientras el digitalizador procesa
los datos del píxel y se restablece. La señal es monitoreada
durante todo el tiempo del píxel obteniendo resultados con una
razón extremadamente alta entre S/R |
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Adquisición
simultánea de imágenes espectrales de 32 canales |
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 El
C1si tiene un PMT Multi-ánodo con 32 canales, el mayor de
cualquier microscopio confocal. Las innovaciones como los
circuitos múltiples de conversión digital de alta velocidad y LVDS
(Low Voltage Differential Signal) tecnología de transmisión serial
de alta velocidad permite la obtención de 32 canales completos
desde un solo escaneo. Esto permite reducir dramáticamente el
tiempo de imagen y el tiempo real de observación. |
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Observación
Diascópica |
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El C1si puede
adquirir imágenes diascópicas simultáneamente con las imágenes
espectrales o confocales estándar. Las técnicas de imagen
diascópica incluyen DIC, campo claro y contraste de fases. Esta
característica es especialmente útil para localizar etiquetas
fluorescentes en tejidos y células. |
