El
Axoporator® 800A es el
primer electroporador comercialmente disponible en el mundo para un
sola célula, representa la convergencia entre biofísica, biología
celular y biología molecular. Este sistema basado en entrega por
micropipeta usa pulsos de voltaje para causar la formación
transicional de poros en membrana a través de los cuales fluyen
moléculas no permeables y/o iones. El mecanismo es el mismo que el
usado para electroporación en masa de células suspendidas –
rompimiento dieléctrico de la membrana por un pulso de voltaje – sin
embargo, la electroporación de célula sencilla ofrece ventajas
diferentes sobre la electroporación en masa.
->
Se puede dirigir a células sencillas para modificación
específica. Ya sea que use células aisladas, rebanada de
tejido o una preparación intacta, esta técnica le permite
enfocarse en una célula individual
->
Se puede dirigir a regiones específicas de la célula de forma
selectiva. Apical vs. Basal, neurona vs. Axón, polo vegetal
vs. Animal – la electroporación de célula sencilla le permite
enfocarse en regiones muy específicas de la célula bajo
estudio. Organelos grandes, aislados, e intactos también son
apropiados para electroporación de célula sencilla
->
Solamente se requieren pequeños volúmenes para
electroporación. Esto ayuda a preservar moléculas raras y
caras.
->
Alto porcentaje de sobrevivencia, 80& en promedio. Las células
toleran mejor la intervención ya que solamente una pequeña
porción de la membrana de la célula se ve envuelta con la
micropipeta que entrega el voltaje. Por lo tanto la célula
puede ser electroporada más de una vez con diferentes genes.
Dos ejemplos de células sencillas seriales en electroporación
consecutiva de tres días. Los plásmidos usados: dsRed1-mito en día
uno, eYfp-golgi el día dos y eCFP-vimetin el tercer día.
Imágenes cortesía del Dr. Jim Rae de la Clínica Mayo, Rochester, MN.
Animación Axoporator 800A
Presione el botón reproducir para iniciar la animación del Axoporator
800A Encienda sus bocinas para escuchar la narración. También está
disponible una versión de pantalla completa en la liga de Descargas y
Literatura en el menú del lado derecho.
Éxito Documentado
El electroporador Axoporator 800A fue desarrollo con consejo y probado
por pioneros en la electroporación de célula sencilla. Sus exitosos
protocolos están documentados en el manual del usuario y notas de
aplicación que acompañan al Axoporator 800A.
El electroporador Axoporator 800A combina dos de las comprobadas
fortalezas de Axon – la tecnología de patch clamp y la generación
precisa de forma de onda. Un LCD, botones y perillas comprenden la
interfase intuitiva del usuario. Todos los pulsos y ajustes del tren
así como la resistencia de la pipeta y las lecturas de energía están
disponibles en la pantalla LCD. Si lo desea, el voltaje y corriente de
la micropipeta se pueden grabar desde los conectores BNC. Se brindan
tres tipos de pulsos diferentes, todos los cuales se pueden ejecutar
en polaridad y en tren. Estos incluyen:
->
“Cuadrado” rectangular
->
Bipolar
->
Binivel – un pulso especial que ha demostrado ser efectivo y eficiente
para la entrega de genes tan grandes como 14kb dentro de la célula.
Control y Diseño Flexible
Aun cuando fue diseñado para el conveniente uso independiente, un
generador de forma de onda externo como el software pCLAMP con una
Digidata 1322A puede actuar como fuente de comando de pulso.
Una vez configurado, el Axoporator 800A se puede activar presionando
un solo botón. Alternativamente, se puede activar a través de un pedal
o un disparo TTL externo, así tiene ambas manos disponibles para
controlar al microscopio y el micromanipulador. Una salida BNC SYNC
puede ser usada para sincronizar un sistema de grabación opcional.
Ha sido nuestra experiencia que los investigadores siempre están
encontrando formas no convencionales e ingeniosas para usar nuestros
productos – de aquí la tradicional flexibilidad del diseño. El
Axoporator 800A incorpora dos características muy importantes en
anticipación a aplicaciones futuras:
->
Una entrada “Solo para Fábrica” para descargar actualizaciones de
firmware ya que el campo
de descubrimientos evoluciona.
->El
rango de voltaje se extiende a 100V, ya que el voltaje óptimo para
electroporación de célula sencilla puede ser de varias decenas de
volts en algunas preparaciones.
El cabezal estándar AP-1A-1MU puede pasar corriente hasta 100mA.
Un cabezal opcional AP-1A-0.1MU puede pasar corriente hasta 1mA.
Conveniencia Agregada
Para ayudar en el posicionamiento de la micropipeta, un monitor con
audio cambia el tono conforme se acerca a la célula y hace contacto.
Este monitor auditivo, junto con el dato de resistencia mostrado,
brinda una útil herramienta para buscar a ciegas células en rebanadas
de tejido.
El comando de rastreo de electroporación es sencillo, ya que tenemos
ambos contadores manual y automático.
La pequeña base del Axoporator hace que sea fácil de colocar junto al
microscopio.
Listo para Usarse
No requiere computadora. Un microscopio, micromanipulador y una fuente
de micropipetas es todo lo que necesita para completar el sistema.
Accesorios Incluidos
Manual de teoría y operación
Cabezal AP-1A-MU (o sustitución opcional por el AP-1A-0.1MU si lo
especifica en su pedido)
Celda modelo SCE-1u (elija entre 10MW/15MW)
Un soporte de electrodo HL-U
Un bastón de montaje
Interruptor de pie
Accesorios de aterrizaje.
Requerimientos Eléctricos
Voltaje de la línea: 100 – 240V entrada de voltaje universal
Frecuencia de la línea: 50 – 60Hz
Información
del Pedido
Axoporator 800A
->
Incluye un cabezal AP-1A-MU o sustitución opcional por el AP-1A-0.1MU
si lo especifica en su pedido.
Este producto se vende bajo licencia de Cellectricon, AB.
El
