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Tecnología multiplicadora de electrones (EM) CCCD para detección de luz
ultra-baja
Las cámaras
Hamamatsu ImagEM (C9100-13 y C9100-14) ofrece imagen de alto desempeño
para virtualmente cualquier aplicación en microscopia óptica. Ya sea que
capture imágenes de luz ultra baja que requieren largos tiempo de
integración o tiempo real, alto promedio de cuadros con fluorescencia de
baja luz, usted puede confiar en la ImagEM para brindarle alta
sensibilidad, estabilidad excepcional, y ruido extremadamente bajo.
-
Alta
sensibilidad: EC máxima de más de 90%, ganancia máxima de 1,200x
-
Alta
estabilidad: Ganancia EM altamente estable, estabilidad mejora de
ganancia
-
Bajo ruido:
Temperatura CCD estrictamente controlada por agua o enfriamiento por
aire forzado, ruido oscuro mínimo, lowCIC
Guía rápida para cámaras ImagEM

Para
ayudarle a determinar si la ImagEM Mejorada es apropiada a sus
necesidades de imagen, resumimos su sensibilidad a la longitud de
onda y otros parámetros importantes en la siguiente tabla.
| Parámetro |
Cámara ORCA-R2 |
| Tipo de sensor de imagen |
EMCCD enfriado 512 x 512 megapíxeles |
| Sensibilidad longitud de onda |
Visible a NIR |
| Intensidad de señal |
Luz ultra-baja (ej.
imagen 1 molécula) |
| Promedio de cuadros a resolución completa |
31.9 cuadros por segundo |
| Tiempo de exposición |
10 microsegundos o más |
| Resolución espacial (tamaño de píxel) |
16 micrones |
La
característica principal y los beneficios de la cámara ImagEM Enhanced se
resumen a continuación. Para mayor información descargue la
hoja de datos
y la
nota técnica o contáctenos por un
correo
| Características
ImagEM Enhanced |
Beneficios |
| CCD de transferencia de cuadro adelgazado de
512 x 512 con transferencia mayor del 90% EC |
Alta velocidad de transferencia y bajos
tiempos de exposición. |
| Píxeles cuadrados de 16 micrones con capacidad
de pozo completa |
Grande rango dinámico en ambos modos de
lectura; normal CCD y EMCCD |
| Ganancia programable por el usuario con
alarmas de protección |
Vida de cámara extendida y menos calibraciones
de ganancia a través del tiempo |
| Lectura EMCCD optimizada y modo dual de
enfriamiento estabilizado |
Ganancia altamente estabilizada y ruido oscuro
mínimo |

Para
ayudarle a determinar si la ImagEM es apropiada a sus
necesidades de imagen, resumimos su sensibilidad a la longitud de
onda y otros parámetros importantes en la siguiente tabla.
| Parámetro |
Cámara ORCA-R2 |
| Tipo de sensor de imagen |
EMCCD enfriado 1 megapíxel |
| Sensibilidad longitud de onda |
Visible a NIR |
| Intensidad de señal |
Luz ultra-baja (ej.
imagen 1 molécula) |
| Promedio de cuadros a resolución completa |
9.5 cuadros por segundo |
| Tiempo de exposición |
10 microsegundos o más |
| Resolución espacial (tamaño de píxel) |
13 micrones |
La
característica principal y los beneficios de la cámara ImagEM Enhanced se
resumen a continuación. Para mayor información descargue la
hoja de datos
y la
nota técnica o contáctenos por un
correo
| Características
ImagEM Enhanced |
Beneficios |
| CCD de transferencia de cuadro adelgazado de
1024 x 1024 con transferencia mayor del 90% EC |
Bajos tiempos de exposición y alta resolución. |
| Píxeles cuadrados de 13 micrones y lectura de
11Mhz |
Empate apropiado a objetivos de gran A. N. y
lectura rápida |
| Ganancia programable por el usuario con
alarmas de protección |
Vida de cámara extendida y menos calibraciones
de ganancia a través del tiempo |
| Lectura EMCCD optimizada y modo dual de
enfriamiento estabilizado |
Ganancia altamente estabilizada y ruido oscuro
mínimo |
Características Especiales
Características de ganancia EM Mejorada.
-
Protección de ganancia incorporada EM
-
La
deterioración de la ganancia (o envejecimiento) es una característica
inherente de todas las cámaras EMCCD, y se puede acelerar por eventos
como exposición no intencional a luz excesiva. Como medida contraria,
la ImagEM brinda niveles de protección ajustables por el usuario y
alertará a los usuarios cuando detecte mucha luz. Esta característica
contribuye a extender la vida de la cámara.
-
Reajuste de ganancia incorporada
-
En el
evento de que la deterioración de la ganancia EM ocurra, la ganancia
se puede reajustar automáticamente a los valores originales a través
de software. Este reajuste se puede hacer sin remover la cámara de su
equipo
-
Control de ganancia EM directa
-
La ganancia
se puede controlar fácilmente a través de cualquier software que
soporte la aplicación de Hamamatsu DCAM. No hay necesidad de referirse
al manual para convertir los valores de sensibilidad y factores reales
de multiplicación EM.
Calidad de
Imagen Mejorada
-
Controladores optimizados para CIC bajo
-
Ya que la
cámara EMCCD tiene un ruido de lectura tan bajo, es necesario lidiar
con elementos de ruido que usualmente son considerados insignificantes
en cámaras CCD enfriadas. Uno de estos elementos la carga inducida por
reloj (CIC), que es un tipo de corriente negra que puede afectar las
imágenes tomadas en exposiciones cortas. La ImagEM está diseñada para
minimizar los efectos del CIC.
-
Nuevo modo de imagen fotón.
-
Una
tecnología única que sobrepasa las limitaciones de las cámaras EMCCD
para manejar niveles de luz de un fotón debido al ruido generado por
el proceso de multiplicación de electrones. Por muchos años, Hamamatsu
ha producido cámaras de conteo de fotones con intensificadores de
imagen especiales. Esta experiencia ha sido aplicada a crear circuitos
únicos para manejar el proceso EM que produce imágenes de alta calidad
en luz ultra baja.
-
Nuevo promedio de cuadros
-
Un
procesamiento de imagen en tiempo real tiene varios cuadros en los
cuales se puede promediar. Brinda aumentos significativos en S/R ya
que tanto el ruido del detector y señal son promediados.
-
Nuevo reductor de ruido spot.
-
Una función
de procesamiento de imagen que ayuda a incrementar el cociente S/R y
la calidad general de la imagen eliminando elementos de ruido como los
rayos cósmicos. Los puntos (spots) de intensidad al azar son
detectados y después evaluados contra las imágenes entrantes.
-
Estabilidad mejorada de offset.
-
La
estabilidad del digitalizador es un tema importante para la
confiabilidad de los datos. En la ImagEM, la fluctuación del offset
del digitalizador está muy bien controlada, mostrando solo algunos
conteos aun a resolución completa de 16 bits y la máxima ganancia EM
Varios
disparadores sincronizados
Varios modos de
disparo están disponible para sincronizar la cámara con dispositivos
externos. Entre estos modos están dos tipos de lectura sincronizada, lo
que previene el bandeo vertical o ruido de banda que ocurre cuando no hay
empate entre la lectura de la cámara y la velocidad de rotación del disco
del sistema confocal.
Aplicaciones
Las cámaras
ImagEM son apropiadas para varias aplicaciones de imagen con luz ultra
baja en el rango
de longitud de onda visible al cercano al infrarrojo que requieren alta
velocidad y tiempos de exposición de 10ms
y más. Ejemplos de estas aplicaciones se listan a continuación.
- Alto promedio de cuadros y tiempos cortos de
exposición de células vivas con baja excitación fluorescente.
- Interacción proteína-proteína.
- Ondas de calcio en redes celulares y flujo de
iones intracelular.
- Microscopia confocal de disco giratorio de tiempo
real.
Imágenes Muestra
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Imagen luminiscente de células
HeLa expresando Renilla Luciferase.
La imagen se muestra traslapando imagen luminiscente (Pseudocolor)
y la imagen real
- Objetivo: 10x
- Método de enfriamiento: agua a -80°C
- Tiempo de exposición: 5 minutos
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Moléculas sencillas fluorescentes
en células HeLa expresando fusión de proteínas H2B-GFP.
- Ganancia EM: 1,200x.
- Tiempo de exposición: 30.5ms
- Datos cortesía de:
- Dr. Maiko Tokunaga, Instituto Nacional
de Genética
- Dr. Kumiko Sogawa, RIKEN RCAI
- Dr. Hiroshi Kimura, HMRO Universidad
de Kioto. Facultad de medicina.
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ORCA D2 comparada contra sensor
de imagen CCD convencional.
Esta imagen
muestra los cambios de iones de calcio estimulados por histamina
con dos posiciones Z y 4 lapsos de tiempo
-
Objetivo
100x
-
Ganancia EM: 300x
-
Tiempo de exposición 300ms
-
Unidad Confocal: CSU por Yokogawa Electric
CO
-
FRET CFP/YFP: imagen de dos longitudes de
onda w-view, óptica A8509
-
Escaneo Z: 19 rebanadas/2.5s platina
piezoeléctrica.
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